Возбудители инфекций верхних дыхательных путей, характеризующихся специфичностью патогенеза и клинической картины. (Лек презентация

Тип: Actinobacteria Тип: Actinobacteria Класс: Actinobacteria Семейство: Mycobacteriасеае Род: Mycobacterium Виды: M. tuberculosis M. bovis M. africanum

МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ ПРИЗНАКИ «ПАЛОЧКИ КОХА» Тонкая и стройная прямая или слегка изогнутая палочка («швейная игла»); Не образует: макрокапсул, эндоспор, жгутиков, но имеет микрокапсулу; В мазках из патологического материала располагается одиночно или группами из 2-3 клеток; Грамположительная (метод окраски применяется редко из-за плохого восприятия микобактериями анилиновых красителей)

ОТЛИЧИЯ МИКОБАКТЕРИЙ ОТ ДРУГИХ ПРОКАРИОТ кислото-, спирто- щелочеустойчивость, высокое содержание в клеточной стенке липидов (до 60%) и кислот: -миколовая, - фтионовая, - туберкулостеариновая очень медленный рост

КИСЛОТОУСТОЙЧИВОСТЬ МИКОБАКТЕРИЙ Высокое содержание липидов в клеточной стенке по Цилю-Нильсену в красный цвет Вместе с тем необходимо иметь в виду, что встречаются и кислотоподатливые микобактерии ( зерна Муха) - окрашивающиеся по Цилю-Нильсену в синий цвет

КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА ПАЛОЧКИ КОХА Международная элективная среда = среда Левенштейна-Йенсена (включает картофельный экстракт, различные соли, яйца, глицерин и малахитовый зеленый как агент, ингибирующий рост контаминирующей микрофлоры) Оптимальная температура = 37°С, M. tuberculosis – аэроб, M. bovis - микроаэрофил Растет очень медленно (одно деление клетки происходит за 14-18 часов), поэтому вывод об отрицательном результате при выделении туберкулезной палочки из питательного материала можно сделать лишь после трехмесячного культивирования: на жидких средах вырастают за 5 - 7 дней – морщинистая пленка, на плотных - в течение 14 - 40 суток - R-формы колоний (похожие на бородавки или цветную капусту) с желтым пигментомпигментом

РОСТ МИКОБАКТЕРИЙ НА СРЕДЕ ЛЕВЕНШТЕЙНА-ЙЕНСЕНА

БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ПАЛОЧКИ КОХА основной биохимический тест, используемый для идентификации – ниациновая проба M. tuberculosis –синтезирует ниацин (никотиновую кислоту) M. bovis – не синтезирует

АНТИГЕНЫ ПАЛОЧКИ КОХА Туберкулин (белок) Полисахариды Фосфатиды Корд-фактор Антигены всех видов микобактерий схожи между собой, вследствие чего серологический метод их идентификации практически не используется

ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ ПАЛОЧКИ КОХА Сульфатиды (серосодержащие гликопротеиды) Корд-фактор (гликолипид, располагающийся на поверхности и в толще клеточной стенки) Липиды Белки

УСТОЙЧИВОСТЬ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ТУБЕРКУЛЁЗА ВО ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ Устойчивы во внешней среде При кипячении погибают через 5 минут Прямой солнечный свет убивает их в течение часа Химические дезинфектанты по отношению к микобактериям малоэффективны 5% раствор фенола убивает их только через 5 - 6 часов 0,05% раствор бензилхлорфенола убивает микобактерии через 15 минут. Туберкулезная палочка способна вырабатывать устойчивость ко многим антибактериальным средствам.

ТУБЕРКУЛЕЗ = ПЕРВИЧНО-ХРОНИЧЕСКОЕ ИНФЕКЦИОННОЕ ЗАБОЛЕВАНИЕ ЧЕЛОВЕКА И ЖИВОТНЫХ, СОПРОВОЖДАЮЩЕЕСЯ ПОРАЖЕНИЕМ ОРГАНОВ И СИСТЕМ наклонность к хроническому течению образование специфических воспалительных изменений, имеющих вид маленьких бугорков (гранулем) с преимущественной локализацией в легких и лимфатических узлах туберкулезная палочка может поражать любой орган и любую ткань с развитием соответствующей клинической симптоматики 3 основные клинические формы: Первичная туберкулезная интоксикация у детей и подростков, Туберкулез органов дыхания, Туберкулез других органов и систем (кожи, костей, почек, суставов)

ТУБЕРКУЛЕЗ ОРГАНОВ ДЫХАНИЯ

ТУБЕРКУЛЁЗНОЕ ПОРАЖЕНИЕ КОЖИ Гистологический препарат

ЭПИДЕМИОЛОГИЯ ТУБЕРКУЛЁЗА Источник инфекции: Больной человек Реже - животное Основной механизм (путь) передачи: аэрогенный (чаще – воздушно-пылевой) Дополнительный механизм (путь) передачи: алиментарный (заражение M. bovis от крупного рогатого скота через молоко и молочные продукты, чаще наблюдается у детей; однако заражение M. bovis от больных животных возможно и аэрогенным путем)

ПАТОГЕНЕЗ ТУБЕРКУЛЁЗА Входные ворота инфекции: дыхательные пути - чаще всего любые слизистые оболочки любой поврежденный участок кожи  Фагоцитами доставляется в региональные лимфатические узлы  Формируется первичный туберкулезный комплекс: гранулема в месте внедрения возбудителя воспалительный процесс в региональных лимфатических узлах сенсибилизация организма  А. Доброкачественное течение - гранулемы кальцифицируются и рубцуются (у человека формируется противотуберкулезный иммунитет, но в гранулеме сохраняется возбудитель). Б. При действии неблагоприятных факторов, снижающих антиинфекционную резистентность организма человека - гематогенная генерализация процесса с образованием множественных очагов, склонных к распаду.

ИНФЕКЦИОННАЯ ГРАНУЛЕМА (БУГОРОК) Образуется в месте внедрения возбудителя = защитная реакция организма, направленная на локализацию возбудителя в месте внедрения Состав: -в центре - гигантские клетки Пирогова-Лангганса с множеством ядер, в них обнаруживаются туберкулезные палочки -центр бугорка окружен эпителиоидными клетками, которые составляют главную массу бугорка -по периферии - лимфоидные клетки

ИНФЕКЦИОННАЯ ГРАНУЛЕМА (БУГОРОК) При неблагоприятном течении (при снижении общей резистентности) может увеличиваться и подвергаться творожистому (казеозному) распаду - как результат: действия токсических продуктов туберкулезной палочки отсутствия в бугорках кровеносных сосудов.

ИНФЕКЦИОННАЯ ГРАНУЛЕМА (БУГОРОК) При благоприятном течении (при наличии достаточно высокой естественной резистентности организма) окружается соединительнотканной капсулой сморщивается пропитывается солями кальция (обызвестляется) туберкулёзная палочка сохраняется = формирование нестерильного (инфекционного) иммунитета к туберкулезу

ИММУНИТЕТ Организм человека обладает высокой естественной резистентностью к туберкулезной палочке Ведущая роль – Т-клетки антитела к корд-фактору и другим факторам вирулентности играют вспомогательную роль ГЗТ  локализация возбудителя путем образования гранулем

ИНФЕКЦИОННАЯ АЛЛЕРГИЯ ПРИ ТУБЕРКУЛЁЗЕ Всегда сопутствует инфицированию туберкулезной палочкой. Выявляется туберкулиновыми пробами (в большинстве стран предпочтение отдается внутрикожному тесту - реакции Манту) В качестве аллергена используется: туберкулин - фильтрат автоклавированной бульонной культуры M. tuberculosis. очищенный белковый препарат туберкулина (ППД).

ПРОБА МАНТУ

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ТУБЕРКУЛЁЗА

БАКТЕРИОСКОПИЧЕСКИЙ МЕТОД ДИАГНОСТИКИ 1. после окраски по Цилю-Нильсену А. прямая Б. после обогащения гомогенизация флотация 2. после окраски флюорохромом (чаще всего - аурамином)

МЕТОДЫ ОБОГАЩЕНИЯ МАЗКА Метод гомогенизации: суточная порция мокроты + равный объем 1% р-ра едкого натра  энергичное встряхивание 10-15 минут  нейтрализация кислотой  центрифугирование  мазок из осадка  окраска по Цилю-Нильс.

КУЛЬТУРАЛЬНЫЙ МЕТОД патологический материал  среда Левенштейна-Йенсена  культивирование – от 2 до 12 недель  идентификация: ниациновая проба биопроба  определение чувствительности к туберкулостатическим препаратам

БИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД патологический материал  морская свинка (0,1 мл подкожно в паховую область или в/брюшинно)  лимфоаденит (5-10 сутки)  положительная реакция на туберкулин (3-4 неделя)  гибель (1-2 месяца) но: изониазидустойчивые штаммы снижают свою вирулентность для морской свинки

УСКОРЕННЫЙ МЕТОД ВЫДЕЛЕНИЯ (МЕТОД МИКРОКУЛЬТУР, МЕТОД ПРАЙСА):

ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ M. TUBERCULOSIS ОТ M. BOVIS: 1. Ниациновая проба Конно: культура микобактерий в жидкой питательной среде + 1 мл р-ра KCN и 1 мл р-ра хлорамина, через несколько минут: ярко-желтая окраска - M. tuberculosis отсутствие её - M. bovis 2. Биопроба - заражение морской свинки и кролика:

ВЫЯВЛЕНИЕ L-ФОРМ ТУБЕРКУЛЕЗНОЙ ПАЛОЧКИ: РИФ с сыворотками против антигенов L-форм. Засев в специальную полужидкую среду с последующей микроскопией образовавшегося через 1,5-2 мес. мутного облачка с включениями (похожего на манную крупу) с помощью фазово-контрастного микроскопа. Многократные пассажи на морских свинках (при этом L-формы повысят свою вирулентность и вызовут инфекцию).

ПРОФИЛАКТИКА ТУБЕРКУЛЁЗА Неспецифическая Санитарно-гигиенические мероприятия, нормализация условий труда и быта, полноценное питание, здоровый образ жизни Специфическая Вакцина БЦЖ (вводится внутрикожно) - живой ослабленный штамм, полученный Кальметтом и Гереном из M. bovis. Вакцинируются дети в возрасте 5 - 7 дней (при ранней выписке из роддома - на 3 день) жизни. Ревакцинацию проводят лицам с отрицательной туберкулиновой пробой. NB: у новорожденных со сниженной резистентностью применяют менее реактогенную вакцину BCG-M (с меньшим содержанием антигена)

ЭТИОТРОПНАЯ ТЕРАПИЯ Препараты первого ряда: изониазид, этамбутол, стрептомицин, пиразинамид, рифампицин. Альтернативные средства: канамицин, циклосерин, ПАСК (парааминосалициловая кислота), этионамид, виомицин, капреомицин, тиоацетазон. После месячного пребывания в стационаре больного, как правило, можно выписывать, однако курс лечения не должен продолжаться менее года.

ВОЗБУДИТЕЛЬ ЛЕПРЫ = MYCOBACTERIUM LEPRAE ●Классификация Отдел: Firmicutes Порядок: Actinomycetales Семейство: Mycobacteriaceae Вид: M.leprae ● По своим морфологическим свойствам схож с туберкулезной палочкой. ● В мазках располагается в виде параллельных групп («пачек сигар») или шаровидными скоплениями. ● На искусственных питательных средах не растет. ● Чистую культуру можно получить при заражении белых мышей в подушечку лапки

ЛЕПРА ●- хроническое заболевание людей, характеризуется: образованием гранулем лепроматозного или туберкулоидного типов ● Инкубационный период варьирует от 3 до 30 лет. ● Развитие заболевания также происходит медленно - в течение многих лет. ● Заражение происходит при длительном и тесном контакте с больным преимущественно воздушно-капельным путем (возбудитель почти всегда содержится на слизистой оболочке носа) Возможно проникновение возбудителя и через поврежденную кожу ● Палочка лепры гематогенным, лимфогенным путями и по нервным окончаниям разносится по организму, не вызывая в воротах инфекции видимых изменений.

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА

КОРИНЕБАКТЕРИИ Отдел: Firmicutes Род: Corynebacterium C. diphtheriae – возбудитель дифтерии var. gravis var. mitis var. intermedius Дифтероиды («коринеформные бактерии»)

МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА ● Грамположительные тонкие (var. gravis – короткие, var. mitis – длинные) палочки средних размеров, ● не образуют макрокапсул и эндоспор ● располагаются в мазке попарно, под углом друг к другу. ● Характерны включения зёрен волютина для выявления которых используют окраску по Нейссеру (тёмные зёрна на фоне жёлтой цитоплазмы)

КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА Растут на сложных питательных средах при 37ОС (на среде Ру – 10-12 ч, на др. средах – сутки). жидкие среды: - пленка + осадок (var. gravis) - муть + осадок (var. mitis) среда Ру (свернутая лошадиная сыворотка): колонии не сливаются (рост в виде «шагреневой кожи») теллуритовые среды (среда Клауберга – кровяно-теллуритовый агар): - серовато-черные колонии R (похожие на цветок маргаритки из-за неровного края и радиальной исчерченности – var. gravis) - S (мелкие – var. mitis)

БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА Для идентификации вида C. diphtheriae: цистиназная активность(проба Пизу) – положительная уреазная активность (проба Закса) – отрицательная

ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ Токсин - основной фактор вирулентности дифтерийной палочки (так как дифтерия вызывается именно токсином, то её можно считать токсикоинфекцией) Дифтерийный токсин блокирует синтез белка на стадии элонгации и в результате токсинемии поражает клетки миокарда, надпочечников, почек и ганглиев периферической нервной системы ферменты вирулентности: - Гиалуронидаза - Нейраминидаза

В НЕРВНОЙ ТКАНИ ЭТОТ ТОКСИН ВЫЗЫВАЕТ ДЕМИЕЛИНИЗАЦИЮ НЕРВНЫХ ВОЛОКОН И, КАК РЕЗУЛЬТАТ – РАЗВИТИЕ ПАРЕЗОВ И ПАРАЛИЧЕЙ Местно дифтерийный токсин вызывает некроз и отек тканей

ГЕН, КОДИРУЮЩИЙ СИНТЕЗ ДИФТЕРИЙНОГО ТОКСИНА, ПРИНАДЛЕЖИТ УМЕРЕННОМУ ФАГУ Следовательно, токсигенностью обладает лишь лизогенная культура (типичный пример фаговой конверсии)

ЭПИДЕМИОЛОГИЯ

Клинические проявления: Клинические проявления: интоксикация фибринозное воспаление в месте проникновения возбудителя Клинические формы: ●Дифтерия зева ● Дифтерия других органов (кожи, раны, половых органов и др.) Патогенез: В месте проникновения образуется фибринозная пленка, которая или тесно спаяна с подлежащей тканью (в месте многослойного плоского эпителия) или (в месте однослойного цилиндрического эпителия – в нижних отделах дыхательных путей) легко отслаивается от подлежащих тканей – «дифтерийный круп».

ПРИ ДИФТЕРИЙНОМ КРУПЕ: ● отслоившиеся фибриновые пленки могут быть причиной асфиксии, ● токсин вызывает еще и местный отек В результате токсинемии поражаются другие органы (чаще всего – миокард), что обуславливает осложнения заболевания

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА

ПАТОЛОГИЧЕСКИЙ МАТЕРИАЛ (ПЛЕНКИ, СЛИЗЬ ИЗ ЗЕВА) ДОЛЖЕН БЫТЬ ДОСТАВЛЕН В ЛАБОРАТОРИЮ НЕ ПОЗДНЕЕ, ЧЕМ ЧЕРЕЗ 3 ЧАСА

КУЛЬТУРАЛЬНЫЙ МЕТОД Посев производят на среды Ру, Клауберга; идентификацию до рода проводят по: морфологическим (наличие зерен волютина) и культуральным (характер и скорость роста на среде Ру, характер роста на среде Клауберга) признакам; идентификацию вида проводят по биохимическим (пробы Пизу и Закса) признакам; биовар gravis идентифицируют по культуральным (колонии в виде цветком маргаритки) и биохимическим (ферментация крахмала и гликогена) признакам.

ОПРЕДЕЛЕНИЕМ ТОКСИГЕННОСТИ in vivo: заражают морскую свинку (подкожно или внутрибрюшинно), при вскрытии павшего животного обращают внимание на увеличенные и гиперемированные надпочечники, in vitro: ставят реакцию преципитации по Оухтерлони.

ПРОФИЛАКТИКА Неспецифическая выявление и изоляция для лечения больных санация бактерионосителей дезинфекция игрушек, которыми пользовались больные дети

ЭТИОТРОПНАЯ ТЕРАПИЯ антитоксическая сыворотка (её введение необходимо начинать как можно раньше, пока токсин не связался с тканью миокарда и нервной системы), антибиотики (-лактамные, тетрациклины, хинолоны; носителей санируют эритромицином). Выписка из стационара возможна после двукратного отрицательного бактериологического исследования.

БОРДЕТЕЛЛЫ Отдел: Gracilicutes Род: Bordetella Патогенные виды: В. pertussis – вызывает коклюш B. parapertussis – вызывает паракоклюш; сходен с коклюшем, но протекает легче; B. bronchiseptica –вызывает бронхисептикоз, у человека встречается редко, в основном у работников собачьих питомников и кролиководов (этот микроорганизм вызывает респираторные заболевания у собак, кошек и кроликов); у человека клинически протекает как острая респираторная вирусная инфекция, под этим диагнозом, как правило, и регистрируется.

МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА

КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА

ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ Факторы адгезии: - пили – обеспечивают адгезию возбудителя на эпителиальных клетках, - филаментозный гемагглютинин и белок наружной мембраны (пертактин) – склеивают бактерии → биопленка, - Капсульные полисахариды – защищают от фагоцитоза Токсины - сложное многокомпонентное вещество, включающее: - эндотоксин, - белковый несекретируемый токсин, небелковый цитотоксин – производное пептидогликана клеточной стенки

ДЕЙСТВИЕ ТОКСИНА: оказывает местное действие, приводящее в результате раздражения нервных рецепторов слизистой оболочки дыхательных путей к спастическому кашлю в результате токсинемии, вызывает: возбуждение дыхательного центра спазм мелких бронхов

Эпидемиология коклюша Эпидемиология коклюша Источник инфекции – больной человек (заразен в течение 1 – 1,5 месяцев болезни) Единственный механизм (путь) передачи – аэрозольный (воздушно-капельный) Патогенез коклюша – обусловлен: воспалительным ответом на размножение возбудителя (слизистая оболочка готани, бронхов, бронхеол и альвеол) действием факторов вирулентности B. pertus

КЛИНИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ КОКЛЮША Катаральная стадия (1 – 2 недели): гриппоподобное состояние слабый, но упорный кашель Пароксизмальная стадия (2 – 4 недели): спастический кашель частая рвота угнетение сознания Стадия выздоровления (4 – 6 недель): постепенное исчезновение симптомов коклюша В настоящее время преобладают (95%) умеренно выраженные и стертые формы заболевания

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА КОКЛЮША

КУЛЬТУРАЛЬНЫЙ МЕТОД ДИАГНОСТИКИ Основной: слизь из верхних дыхательных путей, которую берут с помощью метода «кашлевых пластинок» (во время приступа кашлю ко рту ребенка подставляют чашку Петри с питательной средой) или носоглоточным тампоном, засевают на питательные среды, идентифицируя выделенную культуру по морфологическим, культуральным, биохимическим и серологическим свойствам.

ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ ПАТОГЕННЫХ ВИДОВ БОРДЕТЕЛЛ подвижность (B. bronchiseptica) уреазная активность (B. bronchiseptica и B. parapertussis) РА с видоспецифическими сыворотками

ПРОФИЛАКТИКА КОКЛЮША Неспецифическая Выявление и изоляция больных для лечения

ЭТИОТРОПНАЯ ТЕРАПИЯ легкие формы – пребывание на свежем воздухе тяжелые формы – антибиотики (эритромицин, ампициллин), - нормальный человеческий иммуноглобулин, - антигистаминные препараты, - холодный свежий воздух